คุณภาพความสะอาดและความบริสุทธิ์ของด

คุณภาพความสะอาดและความบริสุทธิ์ของดีเอ็นเอ มีความสำคัญมากในงานชีวโมเลกุล ในการดำเนินงานในด้านชีวโมเลกุลมีความจำเป็นที่จะต้องใช้ตัวอย่างที่มีความบริสุทธิ์สูง เพื่อความแม่นยำในการทดลองและการวิจัย แบคเทอริโอฟาจ T7 เป็นไวรัสที่ใช้แบคทีเรียเป็นโฮสต์เพื่อเพิ่มจำนวนเซลล์ จะเกิดไปพร้อมกับการทำงานของ lytic phage ในการทำลายผนังเซลล์ของแบคทีเรียจนกระทั่งเกิดการแตกของเซลล์ ในจีโนมของแบคเทอริโอฟาจชนิดนี้สามารถ Transfrom ดีเอ็นเอของตนเองเข้าไปในดีเอ็นเอของเซลล์โฮสต์และทำให้เซลล์โฮสต์ตาย ซึ่งเซลล์โฮสต์ที่มีการตอบสนองต่อการTransfromของไวรัสคือเชื้อ e.Coli ซึ่งเป็นแบคทีเรียที่สามารถทำให้เกิดอาการท้องร่วงอย่างรุนแรงจนเกิดอาการช๊อคและเสียชีวิตได้ ดังนั้นแบคเทอริโอฟาจ T7 จึงเป็นอีกทางเลือกหนึ่งที่น่าสนใจในงานด้านชีวโมเลกุล
การศึกษาการปรับกระบวณการสกัดดีเอ็นเอจากแบคเทอริโอฟาจ T7 ครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อสกัดดีเอ็นเอของไวรัส T7 โดยวิธีการปกติในการสกัดดีเอ็นเอของแบคเทอริโอฟาจค่อนข้างสกัดได้ยากและใช้สารเคมีในปริมาณมาก โดยแบ่งขั้นตอนการทดลองออกเป็นสองขั้นตอน ขั้นที่หนึ่งคือการเพาะเลี้ยงไวรัสและแบคทีเรียที่จะใช้ในการทดลอง และขั้นที่สองคือการทดลองปรับกระบวณการสกัดดีเอ็นเอ โดยในการทดลองนี้ได้ปรับความเข้มข้นของ ZnCl2 เป็น 0,5,10,20,40,80 mM, ปรับปริมาณของ Protein Solubilizing Buffer ในการทดลองเป็น 100µl, 200, 300µl ตามลำดับ การปรับปริมาณ Ethanol เป็น 500µl, 550 µl,600 µl ปรับความเข้มข้นของ Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) เป็น 200mM และ 250 mM จากการปรับกระบวนการสกัดดีเอ็นเอของแบคเทอริโอฟาจชนิดนี้ จะทำให้การสกัด ดีเอ็นเอมีความสะดวกและลดปริมาณการใช้สารเคมีได้ ซึ่งผลที่ได้คือสกัดดีเอ็นเอที่มีความบริสุทธิ์สูงและสามารถนำไปใช้ในขั้นตอนการเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอของไวรัสโดยวิธี Polymerase chain reaction.
เมื่อทำการทดลองปรับกระบวนการสกัดในขั้นตอนต่างๆจนเสร็จสิ้นแล้ว พบว่าการเก็บผลค่าความบริสุทธิ์และปริมาณดีเอ็นเอที่ได้จากการทดลอง โดยวัดจากค่าการดูดกลืนแสงจากเครื่องนาโนดรอป ซึ่งพบว่าสามารถสกัดดีเอ็นเอที่มีความบริสุทธิ์สูงและใช้ดีเอ็นเอนี้เป็นดีเอ็นเอต้นแบบได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มีความสำคัญมากในงานชีวโมเลกุล แบคเทอริโอฟาจ T7 จะเกิดไปพร้อมกับการทำงานของ lytic phage Transfrom E.coli ดังนั้นแบคเทอริโอฟาจ T7
T7 T7 ZnCl2 เป็น 0,5,10,20,40,80 มิลลิ, ปรับปริมาณของโปรตีนที่ละลายบัฟเฟอร์ในการทดลองเป็น100μl 200 300μlตามลำดับการปรับปริมาณเอทานอลเป็น500μl 550 ไมโครลิตร 600 ไมโครลิตรปรับความเข้มข้นของกรด Ethylenediaminetetraacetic (EDTA) เป็น 200mm และ 250 มิลลิ จะทำให้การสกัด โพลีเมอห่วงโซ่