Vegetative insecticidal proteins (V

Vegetative insecticidal proteins (Vip) เป็นโปรตีนที่ผลิตขึ้นในช่วงที่เซลล์กำลังเจริญเติบโต (vegetative phase) ของ Bacillus thuringiensis (Bt) สามารถออกฤทธิ์ฆ่าหนอนแมลงในกลุ่ม lepedopteran ได้หลายชนิด โปรตีน Vip3Aa ที่สร้างจาก Bt มีขนาดประมาณ 88kDa แต่เมื่อเก็บรักษาไว้เป็นเวลานานกลับพบว่า Vip3Aa มีขนาดลดลงและสูญเสียความสามารถในการฆ่าหนอนแมลง จึงตั้งสมมุติฐานว่าโปรตีน Vip3Aa อาจถูกย่อยด้วยเอนไซม์โปรตีเอสจากปลายทั้งสองด้าน. โดยด้านปลาย N-terminus จะมีการตัดที่ตำแหน่ง Lys-198 และอาจมีการตัดกรดอะมิโนที่ปลายด้านคาร์บอกซิลบางส่วนออกไปแต่ยังไม่ทราบตำแหน่งที่แน่ชัด จึงต้องการทดสอบให้ชัดเจนว่ากรดอะมิโนด้านปลายคาร์บอกซิลของ Vip3Aa สามารถถูกตัดออกไปได้กี่ตัวโดยที่โปรตีนยังคงสามารถออกฤทธิ์ฆ่าหนอนแมลงได้เช่นเดิม ผู้วิจัยจึงทำการสร้างพลาสมิดลูกผสม pET28b-Vip3Aa ขึ้นมาใหม่ 4 ตัว โดยทำการแทนที่ codon หลังตำแหน่งที่คาดว่าเป็นตำแหน่งที่เกิดการตัด (proteolytic cleavage site) ด้วย stop codon โดยใช้เทคนิค site-directed mutagenesis และเมื่อนำไปทำการผลิตโปรตีน จะได้ชิ้นส่วนของโปรตีนที่มีการตัดกรดอะมิโนด้านคาร์บอกซิลออก ณ ตำแหน่งต่างๆกัน 4 ตัว คือ Vip3Aa-G705sp, Vip3Aa-R744sp, Vip3Aa-L760sp และ Vip3Aa-N776sp ผู้วิจัยสามารถผลิตชิ้นส่วนโปรตีน Vip3Aa-G705sp และ Vip3Aa-R744sp ได้สำเร็จ จากการทดสอบการออกฤทธิ์ฆ่าหนอนกระทู้หอม แสดงให้เห็นว่าการตัดกรดอะมิโนด้านคาร์บอกซิลออกไป 85 (Vip3Aa-G705sp) และ 46 (Vip3Aa-R744sp) ตัว ส่งผลให้โปรตีน Vip3Aa สูญเสียความสามารถในการออกฤทธิ์ฆ่าหนอนกระทู้หอม แต่เมื่อเพิ่มความเข้มข้นของโปรตีนให้สูงขึ้นพบว่าชิ้นโปรตีนที่ตัดกรดอะมิโนด้านคาร์บอกซิลเข้าไปสั้นกว่าสามารถฆ่าหนอนได้มากกว่าชิ้นโปรตีนที่ตัดเข้าไปลึกกว่า นอกจากนี้การตัดกรดอะมิโนด้านคาร์บอกซิลออกไป 46 (Vip3Aa-R744sp) ยังส่งผลให้มีการผลิตโปรตีนลดลงอย่างมาก หากประสบความสำเร็จในการผลิตชิ้นส่วนโปรตีน Vip3Aa-L760sp และ Vip3Aa-N776sp ซึ่งเป็นชิ้นส่วนที่คาดว่าสามารถออกฤทธิ์ฆ่าหนอนกระทู้หอมได้ อาจทำให้ทราบตำแหน่งการตัดกรดอะมิโนปลายด้านคาร์บอกซิล ที่มีความสำคัญต่อการรักษาความสามารถในการออกฤทธิ์ของโปรตีน Vip3A

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 1:

Vegetative insecticidal proteins (Vip) is a protein produced during cell growth (vegetative phase) of Bacillus thuringiensis (Bt) can kill insects, worms, acting in groups of many types of proteins lepedopteran Vip3Aa created from Bt is approximately 88kDa, but when stored at nanklap, found that the Vip3Aa have reduced sizes and losing its ability to kill worms, insects, so the assumption that protein digestion enzymes may be Vip3Aa by Proteases from both ends. By the end of the N-terminus will be cut at the position, and may have to cut the Lys-198 amino acid, silicone carbide end tell some part but still do not know the exact position. So it must be clear that testing the amino acids at the end of the Carboniferous, tell your SIM Vip3Aa can be cut off to many by that protein can still be effective to kill worms, insects. Research, thus creating plasma samit hybrids pET28b-Vip3Aa. 4 by codon position after replacement is expected to occur (proteolytic cleavage site) with a stop codon, using the site-directed technique, mutagenesis, and when producing proteins will be a piece of a protein with acetic acid.Amino silicone carbide side tells a different location Outbox 4 Vip3Aa-G705sp, Vip3Aa-R744sp, Vip3Aa-L760sp, and is Vip3Aa-N776sp researchers can manufacture proteins Vip3Aa-G705sp and Vip3Aa-R744sp successfully. From the testing of slaughter nonkrathu perfume. Showed that the amino acid side wrap Khar told Xin (Vip3Aa-G705sp), 85, and prompty 46 (Vip3Aa-R744sp), as a result, protein Vip3Aa, losing its ability to kill acting nonkrathu perfume. But when I add the concentration of protein with a higher protein pieces found to cut the side amino acids shorter than the power to tell the cardinal SIM can kill a worm than a piece of protein that cuts deeper into the. In addition, the cutting of the amino acid side of Carthage told Xin (Vip3Aa-R744sp), 46 prompty have resulted in significantly reduced protein production. If it succeeds in producing a piece of protein Vip3Aa-L760sp and Vip3Aa-N776sp, which is the piece that is expected to be targeted to kill nonkrathu scent may make known the position of cutting carbide end amino acids tell. That are critical to maintaining the ability of active proteins. Vip3A

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 2:

Vegetative insecticidal proteins (Vip), a protein produced during cell growth (vegetative phase) of Bacillus thuringiensis (Bt) can cause kills insect larvae in lepedopteran variety of protein Vip3Aa generated from Bt is approximately 88kDa however. when kept for a long time to find a Vip3Aa decline and lose the ability to kill insect larvae. He hypothesized that the protein may be digested by enzymes Vip3Aa proteases from both ends. By the end of the N-terminus will be cut at the Lys-198 and may be cut at the end of the amino carboxylic partially out but did not know where exactly. To test it, make it clear that the amino acid carboxyl end of Vip3Aa can be cut out by a protein that kills insect larvae can remain active as before. Our objective was to create a hybrid plasmid. pET28b-Vip3Aa up by 4 replaces the codon positions are expected to be at the cutting position (proteolytic cleavage site) with a stop codon by site-directed mutagenesis technique, and when applied to the production of proteins. Be part of the protein that cuts the amino acid carboxyl side out at four different positions which are Vip3Aa-G705sp, Vip3Aa-R744sp, Vip3Aa-L760sp and Vip3Aa-N776sp. The researchers were able to produce a piece of protein. Vip3Aa-G705sp and Vip3Aa-R744sp successfully tested the effect of killing the insect. Shows that cutting the amino carboxylic out to 85 (Vip3Aa-G705sp) and 46 (Vip3Aa-R744sp) the resulting protein Vip3Aa lose the ability to kill insect venoms. But when the concentration of protein found that higher protein crop amino acid carboxyl side in the shorter pieces of protein that can kill the worms than cut deeper into. In addition to cutting the amino carboxylic out to 46 (Vip3Aa-R744sp) has resulted in a dramatic decrease in protein production. If successful in producing protein fragments. Vip3Aa-L760sp and Vip3Aa-N776sp. This is a piece that can kill the insect is active. May know the location of cutting amino carboxylic's end. Are important to maintain the action of a protein Vip3A.

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 3:

Vegetative insecticidal proteins (Vip) is a protein that is produced in the cell"s growth (vegetative phase) of Bacillus. Thuringiensis (Bt) can kill worms, insects in lepedopteran action group different kinds of protein Vip3Aa created from Bt has approximately 88kDa. But when stored for a long time, it was found that the Vip3Aa was reduced in size and lose the ability to kill หนอนแมลง. The hypothesis that protein Vip3Aa may be digested with protease from both ends. By the N-terminus a cutting position. Lys-198 and may cut amino carboxyl end out some, but I do not know where exactly. Want to make clear that amino acid test end carbon oxygen can be out of Vip3Aa กี่ตัว by protein can still active kill worms, insects such as ever. The build up 4 hybrid plasmid pET28b-Vip3Aa. The instead after the expected position is the position of codon cutting. (proteolytic cleavage site) with stop codon technique and site-directed mutagenesis the manufacture the protein. To have a piece of protein amino acids in carbon oxygen cutting length. At different positions 4, is Vip3Aa-G705sp Vip3Aa-R744sp Vip3Aa-L760sp,,, And the Vip3Aa-N776sp researcher can produce parts and protein Vip3Aa-G705sp Vip3Aa-R744sp success. From the test out power kill beet armyworm. It shows that amino acids in carbon oxygen cutting Lo out 85 (Vip3Aa-G705sp) and 46 (Vip3Aa-R744sp), resulting in a protein Vip3Aa lose the ability of action to kill beet armyworm. But when the concentration of proteins increased found pieces cut amino acids in protein carboxyl into shorter can kill worms have more pieces cut deep into protein. In addition to cut the carbon amino acids (LO out 46 (Vip3Aa-R744sp). The resulting protein production is greatly reduced. If they succeed in manufacturing parts and components Vip3Aa-N776sp Vip3Aa-L760sp protein which is expected สามารถออกฤทธิ์ kill beet armyworm. May make informed position cutting amino carboxyl end The therapeutic action of protein Vip3A ability.