วิเคราะห์หาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการ

วิเคราะห์หาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการพัฒนาวิธีทดสอบ BL ELISA โดยทำการเพาะเชื้อ C. chauvoei ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว Liver infusion broth ภายใต้สภาวะไร้อากาศที่อุณหภูมิ 37°C และเตรียมแอนติเจน BL ในรูปของสารละลายน้ำ (Soluble prot2) โดยวิเคราะห์ขนาดโปรตีนด้วยวิธี Sodium Dodecyle Sulfate-PolyAcrylamide Gel Electrophoresis พบแถบโปรตีนเด่นๆ 4 แถบ ที่มีน้ำหนักโมเลกุลขนาด 37, 47, 72 เเละ 79 kDa ตามลำดับ ทดสอบแอนติเจน BL ด้วยวิธี Western Blotting พบว่าแอนติเจน BL ทำปฏิกิริยากับซีรั่มโค และแพะที่ติดเชื้อแบลคเลก จากนั้นนำไปวัดปริมาณโปรตีนด้วย BCA Protein Assay Kit สามารถนำไปใช้เป็นแอนติเจนในการพัฒนาวิธีตรวจวินิจฉัยโรคโค และแพะต่อไปได้ การทดสอบสภาวะที่เหมาะสมด้วยวิธี Indirect ELISA ด้วย Checker Board Titration พบว่า Antigen ที่ระดับการเจือจาง 10 µg/ml สามารถทำปฏิกิริยาอย่างเหมาะสมกับ Antiserum ของโคที่ติดเชื้อ BL ที่ระดับการเจือจาง 1 : 40 และตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาด้วย Conjugate ที่เจือจาง 1 : 4,000 โดย Diluents ที่เหมาะสม คือ 1%BSA ในการเจือจางซีรั่ม และ Conjugate เมื่อได้ผล Checker Board Titration นำมาทดสอบเบื้องต้นกับซีรั่มโคจำนวน 63 ตัวอย่าง วิเคราะห์หาความสัมพันธ์ของระดับค่าการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน พบว่าระดับไตเตอร์ในแต่ละ Dilution มีความสัมพันธ์เป็นไปในทิศทางเดียวกันกับ Positive serum ซึ่งแสดงให้เห็นว่าโคที่ได้รับวัคซีนแบลคเลกมีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันได้ดี

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 1:

Analysis of the increasing development of test methods for BL ELISA C. chauvoei by Petri in Liver infusion broth liquid food feed fuel under anaerobic conditions at a temperature of 37° C, and preparations in the form of a worm soluble compounds BL (Soluble prot2) by analyzing the size of protein Gel Electrophoresis Sodium Dodecyle ways Sulfate-PolyAcrylamide found one protein bar 4 bar with a molecular weight size, 37, 47, 72 and 79 kDa, respectively. Western Blotting method, worm BL test, it was found that serum react with the worm code BL and goats infected brand loklek then be measured with BCA Protein Assay Kit protein can be used as a worm in the development code, and how to diagnose the disease, goats. The appropriate test conditions with Indirect ELISA method with a Checker Board showed the Antigen Titration level of 10 µg/ml can react appropriately to the Antiserum of infected cows BL at dilution 1:40 and check the reaction with the Conjugate dilution 1:4000 by appropriate Diluents place.Frech is 1% BSA in serum and Conjugate dilution as a result Checker Board use the initial Titration with a serum sample for chrome number 63, relationships of the level up through the immune response. It was found that a kidney on an individual level, there is a relation to Dilution in the same direction with Positive serum, which showed cows that received the vaccine brand loklek responding through Immunology.

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 2:

Determination of the optimal conditions for the development of BL ELISA test for the bacteria were cultured on agar C. chauvoei Liquid Liver infusion broth under anaerobic conditions at a temperature of 37 ° C and BL antigen preparation in the form of a water solution (Soluble prot2). By analyzing protein size by Sodium Dodecyle Sulfate-PolyAcrylamide Gel Electrophoresis. Meet the four dominant protein band with a molecular weight of 37, 47, 72, respectively, were 79 kDa antigen test by Western Blotting showed that BL BL antigen reacts with the serum of cattle. And goats infected Blackwood Lake. Then measure the amount of protein with the BCA Protein Assay Kit can be used as an antigen in the development of diagnostic cattle. And goat next To test the optimal conditions with Indirect ELISA with Checker Board Titration find that Antigen levels diluted 10 μg / ml can react appropriately to Antiserum of cattle infected BL at the dilution 1: 40 and check the reaction. With Conjugate, diluted 1: 4000 by Diluents that is 1% BSA in diluted serum and Conjugate When the Checker Board Titration to preliminary test the serum of cattle of 63 samples analyzed the correlation of the level of response. Immune Dilution serum titer in a relationship is going in the same direction Positive serum, which showed that vaccinated cattle Blackwood Lake a better immune response.

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 3:

Analysis of the optimum conditions for the development of test methods BL ELISA the culture C.Chauvoei in liquid medium Liver infusion broth under anaerobic conditions at 37 ° C and prepare the antigen BL ในรูป of aqueous solutions. (Soluble prot2) by size analysis method Dodecyle protein Sodium Sulfate-PolyAcrylamide Gel Electrophoresis found obvious 4 protein bar bar.37.47.72 and 79 kDa respectively. Test antigen BL way Western Blotting found that BL antigen reacted with serum cattle and goats infected blackleg! Then the quantity of protein BCA Protein Assay Kit.And the goat on test optimization method with Indirect ELISA Checker Board Titration found Antigen level to dilute 10 could g / ml. Can react appropriately to Antiserum of coat infected BL that dilution 1:40 and check the reaction with Conjugate diluted, 1: 4000 by Diluents proper is 1%BSA in dilution, and Conjugate when the Checker Board Titration tested initial serum steroids were 63 samples. Analyze the relationship of the levels of the immune response.Dilution related in the same direction as the Positive serum which shows the coat that vaccinated blackleg is immune response as well.