หลักสำคัญการประยุกต์ใช้ระบบ CRISPR-

หลักสำคัญการประยุกต์ใช้ระบบ CRISPR-Cas9 คือโปรตีน Cas9 ซึ่งมีคุณสมบัติเป็น endonuclease สามารถตัด DNA และทำให้เกิดdouble strand break (DSB)

โดยตำแหน่งที่โปรตีน Cas9 ตัด DNA มีความจำเพาะ (sequence specific) ซึ่งขึ้นอยู่กับลำดับนิวคลีโอไทด์ของ spacer
ที่เป็นต้นแบบสำหรับสร้าง crRNA และจะไปจับกับ DNA ของฟาจ ซึ่งจะนำโปรตีน Cas9
เข้ามาและตัดทำลาย DNA ของฟาจ (รูปที่ 2) โดยหลักการนี้หากสังเคราะห์ลำดับนิวคลีโอไทด์แทนบริเวณ spacer โดยให้
ลำดับนิวคลีโอไทด์นั้นเหมือนกับบริเวณของยีนที่ต้องการตัด ลำดับนิวคลีโอไทด์นั้นจะเป็นต้นแบบและคัดลอกรหัสเป็น
RNA เรียกว่า synthetic single guide RNA (sgRNA) ซึ่งทำหน้าที่เปรียบเหมือนกับ crRNA ไปจับกับยีนที่มีลำดับ
นิวคลีโอไทด์ที่เป็นคู่สมกัน และจะชักนำให้โปรตีน Cas9 เข้ามาจับและตัด DNA ในบริเวณดังกล่าวอย่างจำเพาะ
ทำให้เกิด DSB ของสาย DNA (Bassett & Liu, 2014) เมื่อเกิด DSB ขึ้น เซลล์จะมีกระบวนการที่จะซ่อมแซม DNA ตัวเองซึ่ง
อาจจะเกิดจากกระบวนการ homologous recombination (HR) หรือ nonhomologous end joining (NHEJ) การใช้
ระบบ CRISPR-Cas9 จะมีข้อดีคือใช้เวลาที่สั้น สามารถกำหนดบริเวรที่จะให้เกิด DSB ได้อย่างจำเพาะมากกว่าการชัก
นำให้เกิด DSB โดยการใช้สารเคมีหรือรังสีซึ่งช่วยให้การทำให้เกิดการกลายพันธุ์หรือการเปลี่ยนแปลงยีนทำได้อย่าง
จำเพาะมากขึ้น (Sokolov et al., 2005; Dmitrieva et al., 2011)

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 1:

The core applications of the system CRISPR-Cas9 is the protein which is a endonuclease Cas9 can cut DNA double strand break and cause (DSB). By location of protein specific DNA cutting Cas9 (specific sequence), which depends on the sequence of nucleotides spacer. That is a template for creating crRNA, and will go with the DNA of fat which will take protein Cas9.And cut the DNA of fat destruction (Figure 2) by this principle, if a synthetic nucleotide sequence instead of the area. Spacer by them.Nucleotide sequence is similar to the grounds of the genes. Nucleotides sequence, it will be the template and copy the code.RNA is called synthetic single guide RNA (sgRNA), which acts like crRNA to catch up with gene sequences.Nucleotides are cooperative and will induce protein and DNA-cutting handles incoming Cas9 in such area specifications.Causes of DNA DSB cable (Bassett & Liu, 2014) there will be a process of cell based DSB repair DNA itself, which.May be due to the process of homologous recombination or nonhomologous end joining (HR) (NHEJ) to use.CRISPR-Cas9 systems is the use of a short time can cause a sin to DSB dopri? more than tug specifications.Leading the cause by using the DSB chemicals or radiation, which helped to cause mutations, or changes in the genes do.Specifications (Sokolov et al., 1995; et al., Dmitrieva)

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 2:

The main application of the system CRISPR-Cas9 protein Cas9 which features an endonuclease to cut DNA and induce double strand break (DSB)

by the protein Cas9 cutting DNA with specificity (sequence specific), based on sequence New. Cleo's Tide spacer
to create a model for crRNA and get to grips with the DNA of the phage protein, which will bring. Cas9
to cut and destroy the DNA of the phage (Figure 2) In principle, if a synthetic nucleotide sequence represented by a spacer
sequence of nucleotide region of the same gene that needs cutting. No. nucleotide is a prototype and copy the code as
RNA, called synthetic single guide RNA (sgRNA), which acts like a crRNA to grips with the gene sequences
nucleotide is a congruence. And to induce protein Cas9 to catch and cut the DNA in the areas specifically
causes DSB's line DNA (Bassett & Liu, 2014) when the DSB in cells is the process to repair DNA itself, which
may be due. the homologous recombination (HR) or nonhomologous end joining (NHEJ) of the
CRISPR-Cas9 system would have the advantage of a shorter time. You can set the DSB's duty to be more specific seizure
led to the DSB without the use of chemicals or radiation, helping to cause mutations or genetic changes be made
more specific (Sokolov et al. , 2005; Dmitrieva et al., 2011).

ผลลัพธ์ (อังกฤษ) 3:

Main applications CRISPR-Cas9 is protein Cas9 which qualify as endonuclease can cut DNA cause and double. Strand break (DSB).The protein Cas9 cut DNA specificity (sequence specific), which depends on the nucleotide sequence of the spacer.A model for the creation of crRNA and going to catch up with DNA of phages, which will bring Cas9 protein.Come in and cut down DNA of phages (Figure 2) by this principle, if the synthetic nucleotide sequence instead of the spacer by.Nucleotide sequence as the gene to cut. Nucleotide sequence is original and copy the code.RNA called synthetic single guide RNA (sgRNA), which acts like a crRNA catch with genes, respectively.Nucleotide is matched, and will induce protein Cas9 to catch and cut DNA in the area such as specific.Cause DSB of DNA (Bassett & Liu 2014), when DSB up cells would have to repair process DNA itself.May be due to the process homologous recombination (HR) or nonhomologous end joining (NHEJ) use.The system has many advantages CRISPR-Cas9 is spent at short. The shift to achieve a specific service DSB more seizures.The DSB by chemical or radiation, which helps to cause mutations or changes in genes do.More specific (Sokolov et al, 2005; Dmitrieva et al, 2011).